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當前位置:首頁技術文章CellGS TRIFic detection assay 說明書

CellGS TRIFic detection assay 說明書

更新時間:2017-11-20點擊次數:1924

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Cell Guidance Systems位于英國劍橋。我們成立于2010年,于2011年開設了美國辦事處。多年來,我們一直悄然建立起質量,服務和創新的聲譽。我們是世界上zui激動人心的生物技術區域之一。我們致力于為世界各地的研究團體(包括日本,美國,荷蘭,意大利,新加坡和英國)帶來創新,開發擴大生命科學研究可能性的產品。我們的許多產品都是真正具有開創性的:例如,ETS-胚胎培養基(在劍橋大學的Magdalena Zernicka-Goetz教授實驗室開發)能夠從干細胞中生產人造胚胎。PODS™(在京都理工學院森山教授實驗室開發)克服了蛋白質的穩定性限制,為新療法提供了希望。

除了提供試劑和研究服務,我們還參與了基于PODS™技術的幾個治療研究領域。我們正在與英國,意大利和日本的研究人員和公司進行合作,為各種疾病開發疫苗和治療藥物。

 

TRIFic™ detection assay

CodeDescription
EX101TRIFic™ CD9 Exosome Assay, 96 wells
EX102TRIFic™ CD63 Exosome Assay, 96 wells
EX103TRIFic™ CD81 Exosome Assay, 96 wells

 

概觀

TRIFic™外泌體測定與ELISA測定類似,但有一些顯著差異。與ELISA測定不同,沒有酶促反應。而是直接用Europium標簽檢測目標。TRIFic™外泌體分析快速提供純化或未純化樣品的定量數據,包括以方便的96孔格式直接測量血漿中的外泌體。TRIFic™外泌體分析可用于廣泛使用的外來體標志物; 四跨膜蛋白CD9,CD63和CD81。TRIFic™exosome分析提供清晰,一致的數據。

屬性

在TRIFic TM外泌體測定中,使用相同的抗體來將靶與測定板結合并用于檢測。該測定法由與鏈霉抗生物素包被的平板結合的單克隆抗體(用生物素標記)組成,其捕獲存在于外泌體表面上的蛋白質(圖1)。隨后,使用相同的單克隆抗體(用銪標記)進行檢測。由于捕獲和檢測抗體是相同的,它們需要兩個相同表位的連接拷貝才能檢測到信號。外來體提供了一個理想的結構來連接CD9分子,并允許在該測定中檢測CD9。外來體通常具有朝向附著表面的多個CD9拷貝和可用于檢測的另外的CD9分子。捕獲和檢測抗體的任何非特異性結合都不可能產生信號。

 


TRIFic™外泌體分析示意圖。

  1. 生物素化的抗體與鏈霉抗生物素包被的測定板結合。  
  2. 生物樣本被添加。外來體和任何游離抗原被抗體捕獲。 
  3. 銪標記的抗體被加入并與外來體抗原特異性結合。結合的單體的表位已經被占用并且未被檢測到。樣品在時間分辨熒光板閱讀器上讀取。

優點

  • 測定的簡單性導致高度的重現性。
  • 銪被用于檢測,提供高度的靈敏度。  
  • 只有抗原顯示在樣品內的支持物上的多個拷貝(如在外泌體上的四跨膜蛋白)可用該測定法檢測,導致特異性增加。

產品數據

使用TRIFic TM外來體測定法對純化的外泌體進行滴定顯示在寬范圍內外泌體和TRF單位的量之間的線性關系。該測定能夠檢測亞微克級別的外泌體。 

 

用純化的外來體摻入的生物樣品(用PBS稀釋1:1或1:5)顯示了即使在復雜的生物流體如血漿和腦脊液中的測定的靈敏度。

 

對各種細胞系進行CD9 TRIFic TM外泌體測定。超過80個樣品加上標準可以用一個試劑盒進行測試。  

 

在20個癌癥患者尿液樣品中的CD9的TRIFic TM外泌體測定分析顯示了廣泛的外泌體含量。

參考

Agnieszka Kaminska,Mark Platt,Joanna Kasprzyk,Beata KuVnierz-Cabala,Agnieszka Gala-Budzinska,Olga Wofnicka,Benedykt R.Jany,Franciszek Krok,Wojciech Piekoszewski,Marek Kufniewski等人。(2016)。尿胞外囊泡:糖尿病患者腎功能的潛在生物標志物。 糖尿病研究雜志 2016年,文章ID 5741518。

 

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