CRITICAL DIAGNOSTICS Presage®ST2 Assay 

PRESAGE®測定

Critical DiagnosticsPresage®ST2檢測試劑盒是一種體外診斷設備，可通過酶標免疫吸附測定（ELISA）以微量滴定板形式定量測量血清或血漿中的ST2。Presage®ST2分析法可與臨床評估結合使用，以幫助評估診斷為心力衰竭的患者的預后。

Presage®ST2控件，級別1和級別2，旨在用于驗證Critical DiagnosticsPresage®ST2檢測試劑盒的性能。

該測定用七種標準校準，范圍在3.1至200.0 ng / ml之間。ST2的標準分析臨界點為35 ng / ml。

ST2與利鈉肽結合使用

ST2和利鈉肽（例如NT-proBNP）是對單獨的和不同的生物學過程的測量。ST2和利鈉肽提供獨立且互補的預后信息。有關更多信息，請參閱《使用說明》手冊。

Presage ST2 質控品試劑盒與 Presage™ST2 檢測試劑盒配合使用，Presage™ST2 檢測試劑盒是一種單克隆抗體夾心 ELISA，96 孔微量滴定板形式。質控品以密封、凍干小瓶形式提供。在規定體積的去離子水中復溶后，使用與臨床供試品相同的方案分析對照品。

簡介

使用標準 PCR 技術，將 ST2 的人 cDNA 克隆（GeneBank 登錄號 NM 003856）用作源序列，以創建表達載體，包括蛋白氨基末端區域中摻入組氨酸純化標簽的整個人可溶性 ST2 (sST2) 序列。通過 DNA 測序確認表達克隆的完整性。重組蛋白通過瞬時轉染和在人胚腎細胞 (HEK293) 中表達產生。重組 ST2 蛋白通過將細胞裂解液通過金屬螯合柱特異性結合摻入表達蛋白的組氨酸純化標簽進行純化。通過 Coomasie 染色 PAGE 凝膠確認重組 ST2 的純化，以驗證預期分子量 58 kDa。通過 Bradford 蛋白試驗進行定量，并使用專有 ST2 參比貯備液對濃度進行歸一化。

Presage sST2 Assay 試劑盒質控品的基礎基質是脫脂人血清，添加疊氮化納 (0.09%) 作為防腐劑。該基質對試驗無已知影響。此外，制備的質控品濃度應確保在分析前將其稀釋 50 倍，與用于臨床檢測樣本的程序*相同，可能是 EDTA 血漿、肝素血漿或血清。

對照濃度

對照品以 2 種濃度生產；1 種在正常參考范圍內，1 種在心臟病患者（如急性心力衰竭 (AHF)）的濃度范圍內。在參考區間分析中確定的中位 ST2 濃度為 18.8 ng/mL 和 97.5 ng/mL。^th百分位數為 45.6 ng/mL。制備的低濃度質控品的終濃度在中位值 18.8 ng/mL 和上限范圍內

≤35 ng/mL，約為 85^th正常百分位數。AHF 患者的中位 sST2 濃度為 65.3 ng/mL，75^th105 ng/mL 時的百分位數。制備高濃度對照品，使其終濃度在這些值的限定范圍內，工作目標濃度≤85 ng/mL。65.3 至 105 ng/mL 的濃度范圍代表分析有效和臨床顯著濃度。每批質控品均提供了特定的賦值目標值和 QC 范圍，并打印在相應的檢驗報告單上。

表 1：特定閾值下自我報告的健康隊列的 ST2 濃度

提供的試劑和材料：

1. ST2 低水平質控品（1 瓶）
2. ST2 高水平質控品（1 瓶）
3. 使用說明書

需要但未提供的材料：

1. 精密移液器：5 l、100 l 和 1.0 mL
2. 一次性移液器吸頭

警告和注意事項

這些質控品預期僅與 Presage®ST2 檢測試劑盒配合用于體外診斷。

這些質控品含有人血清衍生材料，應視為可傳播傳染病進行處理。對該材料生產中使用的每種血清、血漿或全血單位進行了檢測，發現對 HIV、HCV 抗體呈陰性，對 HBsAg 無反應性。由于沒有任何試驗方法可以*確保不存在傳染性病原體，因此應將該材料視為能夠傳播傳染性疾病的材料進行處理，并根據當地法規作為生物危害性廢物進行處置。

本品含有低于 0.1% 的疊氮化納，可能與鉛或銅管反應，形成潛在的爆炸性金屬疊氮化物。處置時，用大量水沖洗，以防止疊氮化物堆積。

儲存條件：

當在冷藏溫度 (2-8 ℃) 下儲存時，密封小瓶可穩定 1 年。復溶后儲存的小瓶在冷藏溫度 (2-8 ℃) 下可穩定儲存多 7 天。

CRITICAL DIAGNOSTICS Presage®ST2 Assay

試劑制備和使用：

1. 從包裝中取出小瓶，用對照批次檢驗報告中規定體積的去離子水復溶，并偶爾輕輕渦旋 30 min。請勿振搖。請勿機械混合。

1. 請參閱 Presage®ST2 檢測試劑盒的標本檢測說明，并像其他標本一樣運行質控材料。

1. 使用后，更換膠塞并在 2-8 ℃ 下儲存，以獲得長 7 天的復溶穩定性。

1. 建議每次試驗均包括對照品（一式兩份）。

預期結果

評價單個檢測試劑盒時，標準曲線應與 Presage ST2 檢測試劑盒隨附的使用說明書中提供的示例相似，并且兩種質控品的結果均應在的 QC 范圍內。如果這些條件中的任何一個不滿足，用戶應考慮重復測定并評價意外性能的潛在原因。

其他信息

如需了解更多信息或問題，請致電 1-877-700-1250 分機號：Critical Diagnostics。3 或 1-858-270-2400。

精密度

根據標準方案程序，使用三 (3) 個檢測試劑盒，對各水平的一組三 (3) 個隨機選擇的小瓶進行復溶和檢測。結果總結見表 2。各濃度和各批次均符合≤10%CV 的質量標準。

表 2：質控品批次 1（R23-33A 和 R23-33B）的結果

CRITICAL DIAGNOSTICS Presage®ST2 Assay

干擾

在配制特異性對照品之前，檢測基質試劑（脫脂人血清）的內源性 ST2 濃度。然后通過向基質試劑中加入計算量的重組 ST2 配制單個對照濃度，以達到所需的終濃度。該基質對試驗無已知干擾或其他影響。