??產(chǎn)品基礎(chǔ)信息  

貨號(hào)：125-05061

英文名：Lysyl EndopeptidaseR, Mass Spectrometry Grade (Lys-C)  

中文名：賴(lài)氨酰肽鏈內(nèi)切酶，質(zhì)譜級(jí)  

品牌：FUJIFILM Wako（富士膠片和光）  

Cas:125-05061

規(guī)格：常見(jiàn)為20 μg/支（可組合購(gòu)買(mǎi)多支裝）  

儲(chǔ)存條件：-20℃干燥保存，避免反復(fù)凍融  

分子量：約30,000 Da（SDS-PAGE檢測(cè)）  

活性單位：≥0.03 AU/vial（30℃, pH9.5條件下每分鐘催化生成1 μmol對(duì)硝基苯胺）  

??詳細(xì)介紹  

1?? 來(lái)源與特性  

Wako Lys-C酶源自無(wú)色桿菌（Achromobacter lyticus），通過(guò)基因重組技術(shù)實(shí)現(xiàn)高純度表達(dá)。作為氨酸蛋白酶家族成員，其最適pH為9.0-9.5，等電點(diǎn)6.9-7.0，能在含尿素（4M）或SDS（0.1%）的變性環(huán)境中保持穩(wěn)定活性。  

2?? 作用機(jī)制  

該酶特異性切割賴(lài)氨酸（Lys）殘基的C端肽鍵，對(duì)鄰近氨基酸序列無(wú)顯著偏好性（如Pro殘基可能抑制切割）。與Trypsin聯(lián)用時(shí)，可顯著提升蛋白質(zhì)的酶解覆蓋率，尤其適用于膜蛋白、復(fù)雜組蛋白等難消化樣本。  

3?? 應(yīng)用場(chǎng)景  

- 蛋白質(zhì)組學(xué)研究：用于肽段制備，輔助質(zhì)譜鑒定翻譯后修飾（如磷酸化、泛素化）  

- 生物制藥開(kāi)發(fā)：?jiǎn)慰寺】贵w鉸鏈區(qū)切割、重組蛋白質(zhì)量控制  

- 基因編輯驗(yàn)證：CRISPR相關(guān)蛋白的純化與功能分析  

- 交聯(lián)質(zhì)譜（XL-MS）：解析蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)及相互作用網(wǎng)絡(luò)  

??核心優(yōu)勢(shì)詳解  

? 高特異性與低自切活性  

Lys-C僅識(shí)別賴(lài)氨酸C端，錯(cuò)誤裂解率低于3%（Trypsin單獨(dú)使用為8%），顯著提升質(zhì)譜數(shù)據(jù)可靠性。  

? 低劣條件耐受性  

在pH4.0-11.0、30℃環(huán)境下穩(wěn)定保存，50℃以上活性下降但仍?xún)?yōu)于同類(lèi)產(chǎn)品。  

? 靈活的樣本兼容性  

支持凝膠內(nèi)酶切、溶液內(nèi)酶切等多種模式，尤其適合SDS-PAGE膠回收樣本的消化。  

? 批次一致性保障  

采用大腸桿菌重組表達(dá)技術(shù)，通過(guò)ISO9001和ISO/IEC17025認(rèn)證，批間差異<5%。  

? 經(jīng)濟(jì)高效的包裝設(shè)計(jì)  

20 μg/支的小包裝設(shè)計(jì)減少浪費(fèi)，單支可完成100-200個(gè)樣品的酶切。  

?購(gòu)買(mǎi)常見(jiàn)問(wèn)題與解答  

Q1：Lys-C與Trypsin聯(lián)用比例如何確定？  

A：推薦比例為1:50（Lys-C:Trypsin），具體需根據(jù)樣本類(lèi)型優(yōu)化。  

Q2：酶切后肽段如何純化？  

A：建議使用ZipTip或C18固相萃取柱脫鹽，再通過(guò)質(zhì)譜分析。  

Q3：能否用于磷酸化蛋白分析？  

A：可以！Lys-C不會(huì)切割磷酸化位點(diǎn)，是磷酸化研究的理想選擇。  

Q4：長(zhǎng)期保存是否需要添加穩(wěn)定劑？  

A：無(wú)需額外添加，凍干粉在-20℃可穩(wěn)定保存2年。  

Q5：與競(jìng)品（如Thermo Fisher Lys-C）相比有何優(yōu)勢(shì)？  

A：Wako Lys-C純度更高（SDS-PAGE單一條帶），且提供更靈活的包裝規(guī)格。

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